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植物組織培養(yǎng)技術(shù)

  1. 用于組織培養(yǎng)的植物組織的制備是在無(wú)菌條件下，由層流柜提供的HEPA過(guò)濾空氣中進(jìn)行的。
  2. 將組織在無(wú)菌容器中培養(yǎng)，例如培養(yǎng)皿中的陪替氏培養(yǎng)皿或燒瓶中，其溫度和光強(qiáng)度均受控。
  3. 來(lái)自環(huán)境的活植物材料在其表面（有時(shí)是內(nèi)部）上自然受到了微生物的污染，因此在獲取合適的樣品（稱為外植體）之前，應(yīng)先用化學(xué)溶液（通常是酒精，次氯酸鈉或次氯酸鈣）對(duì)它們的表面進(jìn)行滅菌處理。
  4. 然后通常將無(wú)菌外植體置于無(wú)菌固體培養(yǎng)基的表面上，但有時(shí)直接置于無(wú)菌液體培養(yǎng)基中，特別是在需要細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)。
  5. 固體和液體介質(zhì)通常由無(wú)機(jī)鹽加上一些有機(jī)營(yíng)養(yǎng)素，維生素和植物激素組成。固體培養(yǎng)基是從液體培養(yǎng)基中加入膠凝劑（通常是純化的瓊脂）制成的。
  6. 培養(yǎng)基的成分，特別是植物激素和氮源（硝酸鹽對(duì)銨鹽或氨基酸）對(duì)從初始外植體生長(zhǎng)的組織的形態(tài)具有深遠(yuǎn)的影響。
  7. 例如，過(guò)量的生長(zhǎng)素通常會(huì)導(dǎo)致根部增殖，而過(guò)量的細(xì)胞分裂素可能會(huì)產(chǎn)生芽。
  8. 生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的平衡通常會(huì)產(chǎn)生無(wú)組織的細(xì)胞或愈傷組織生長(zhǎng)，但是生長(zhǎng)的形態(tài)將取決于植物種類以及培養(yǎng)基組成。
  9. 隨著培養(yǎng)物的生長(zhǎng)，通常將切片切成薄片，然后將其繼代培養(yǎng)到新的培養(yǎng)基上，以使其生長(zhǎng)或改變培養(yǎng)物的形態(tài)。組織培養(yǎng)者的技能和經(jīng)驗(yàn)對(duì)于判斷培養(yǎng)的碎片和丟棄的碎片很重要。
  10. 當(dāng)芽從培養(yǎng)物中出來(lái)時(shí)，可以將它們切成薄片并與生長(zhǎng)素生根，以產(chǎn)生小植株，當(dāng)小植株成熟時(shí)，可以將其轉(zhuǎn)移到盆栽土壤中，以作為普通植物在溫室中進(jìn)一步生長(zhǎng)。
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